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文章分享|MIRA核酸快檢，助力男性Y染色體AZFc區域缺失早期診斷
近年來，男性不育問題逐漸受到廣泛關注，其中，Y染色體微缺失是導致男性不育的一個重要原因，尤其是Y染色體AZFc區域的缺失。由于此類缺失的早期癥狀不明顯，且傳統檢測方法需要高端設備和較長時間，很多基層醫療機構難以開展相關檢測，錯失了早期干預的時機。因此，如何開發一種簡單、快速且高效的檢測方法，成為解決這一問題的關鍵。 為了彌補這一空白，徐州婦幼保健院張燕團隊基于MIRA技術平臺成功開發了兩種新的快速檢測方法，能夠有效、快捷地檢測男性Y染色體AZFc區域缺失。 研究設計與實驗流程
樣本收集與分組 本研究從臨床中收集了男性不育患者的血樣或精液樣本。根據Y染色體上的SRY基因位點、sY254和sY255位點是否缺失，將樣本分為以下三組： 1.AZFc缺失組：確認AZFc區域缺失的樣本。 2.AZFc非缺失組：未出現AZFc區域缺失的樣本。 3.陰性對照組：無任何Y染色體微缺失的正常男性樣本。 檢測位點選擇 本研究設計并應用了以下兩種新型檢測方法： 三重實時熒光（RT-MIRA）方法：通過三重探針同時檢測sY254、sY255和SRY基因位點的熒光信號，利用實時熒光技術實現快速檢測。與傳統qPCR方法相比，RT-MIRA方法的操作更為簡便，檢測時間顯著縮短。 三重MIRA-LFD方法：MIRA結合三重層析試紙條（LFD），通過目視檢測層析條帶的顏色變化，快速判斷樣本是否存在Y染色體AZFc區域缺失。這種方法不僅能夠提供實時反饋，還能顯著降低對實驗設備的依賴。 數據分析 為評估這兩種新方法的準確性和可靠性，研究使用了Kappa一致性分析等統計學方法，與傳統的多重實時熒光定量PCR方法的結果進行對比。通過分析檢測結果的一致性，進一步驗證新方法在臨床應用中的可行性。 新方法的效果與優勢
一 方法學評價 研究顯示，三重RT-MIRA和三重MIRA-LFD方法能夠在39℃的環境下，在短短15-20分鐘內完成擴增反應，檢測限與傳統多重實時熒光定量PCR方法相當。與傳統方法相比，新方法的反應時間明顯縮短，且對實驗環境的要求更低，操作也更加簡便。 二 臨床樣本檢測 在50例臨床樣本的檢測中，使用新方法的結果與傳統PCR方法完全一致。Kappa一致性分析結果顯示，新方法的檢測結果與傳統方法之間的相關性極高，表明新方法在準確性和可靠性方面具有高度一致性。 三 特異性與靈敏度 經過綜合評估，新方法在檢測Y染色體AZFc區域缺失方面，表現出了極高的特異性和靈敏度。即使在低濃度樣本中，新的檢測方法也能準確檢測出AZFc缺失，極大地提高了早期診斷的準確性。
優勢一 高效快速 MIRA技術能夠在39℃的環境下，僅需15-20分鐘就完成整個檢測過程，顯著縮短了檢測時間。 優勢二 操作簡便 MIRA技術不需要復雜的實驗操作和昂貴的設備，普通實驗室即可進行檢測。 優勢三 低成本 相較于傳統PCR方法，MIRA技術整體解決方案的綜合投入成本低，適合基層醫院和POCT環境使用。 優勢四 環境適應性強 MIRA技術對實驗環境的要求較低，能夠在資源有限的環境中快速、準確地完成檢測。 通過三重RT-MIRA和三重MIRA-LFD這兩種新方法的早期檢測，可以為男性不育患者提供及時的診斷，進而為他們制定科學的生育計劃，幫助其提高生育率。特別是對有家族歷史或長期不育癥狀的男性，提前發現Y染色體微缺失，為患者提供早期干預措施，能夠有效降低不育風險。
安普未來多酶恒溫快速核酸擴增技術MIRA技術在恒溫39°C-42°C下核酸擴增，反應時間僅為5-20 min。此外，不需要嚴格的實驗室條件，應用場景多元化：綜合醫院檢驗科、基層醫療、居家檢測、田間地頭等。 試劑產品形態多樣化：凍干粉、凍干微球等；顯示結果的多樣性：凝膠電泳、熒光曲線、膠體金試紙條等。試劑性能穩定、便于操作、方便存儲運輸。 并以MIRA為核心平臺技術研發出“超快速核酸釋放技術”、“雙通道恒溫熒光檢測儀”、“一體化全自動封閉檢測系統”、“自測型核酸檢測裝置”等一系列配套產品，打造快速分子檢測整體解決方案。 |
